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    行業新聞

    成都金銀花提取物中綠原酸含量的檢測辦法

    發布時間: 2018-03-20 20:17   1830 次瀏覽

    金銀花FlosLonicerae又名忍冬、雙花,為臨床常用中藥,具有清熱解毒、涼散風熱之成效,主治癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風熱傷風、溫病發熱等。在中成藥中,金銀花或以細粉直接入藥,或以提取物的方式入藥,但大部分制劑以后者的方式入藥。

    ??意圖樹立金銀花提取物中綠原酸含量的HPLC測定辦法。辦法國產C18柱(4.6mm×250mm,7μm);活動相為乙腈:0.4%磷酸(12∶88);檢測波長為327nm;流速1ml·min-1;進樣量10μl;柱溫25℃。成果綠原酸在0.0716~0.6444μg范圍內線性關系******,r=0.9996;均勻回收率99.99%,RSD=1.61%(n=6)。定論該辦法簡潔、快速、******,可用于金銀花提取物的含量測定及質量操控。

    ??金銀花入藥有兩種方式,一是以全草直接投料,煎煮入藥,即以煎煮液(即藥材的提取液)作為半成品(中間體);另一種是先提取有用部位,而后以提取物投料,即以提取物作為中間體(原料)為了有用操控金銀花提取物(中間體)的內涵質量,本試驗參考了有關文獻[2,3]及2005版《我國藥典》[4]辦法,選用高效液相色譜法測定金銀花提取物中綠原酸含量。

    ??1儀器與試藥

    ??Agilent1100series高效液相色譜儀(G1322A排氣閥,G1311A泵,G1316A柱溫箱,G1314A紫外檢測器),chemistation色譜工作站,KromasilC18色譜柱,超聲提取器,綠原酸對照品(我國藥品生物制品判定所,批號110753-200212),金銀花提取物(本試驗室克己),乙腈,磷酸均為剖析純;水為雙蒸水。

    ??2辦法與成果[5]

    ??2.1剖析辦法的樹立——別離及檢測條件的選擇

    ??2.1.1色譜條件色譜柱為國產KromasilC18柱(250mm×4.6mm,7μm);柱溫25℃;活動相為乙腈-0.4%磷酸(12∶88);流速為1ml·min-1;檢測波長327nm。

    ??2.1.2pH值對峰形的影響綠原酸歸于有機酸類物質,在HPLC測定時易發作前沿或拖尾峰,活動相參加酸能夠改進這種現象。本試驗比較了水、乙酸、磷酸對峰形的影響,當選用0.4%磷酸時,可得到較好的色譜峰形。

    ??2.1.3色譜體系適應性試驗在選定條件下,綠原酸和樣品中其他組分可基線別離,綠原酸與其相鄰色譜峰的別離度大于1.5,理論塔板數(N)為5000以上。

    ??a-對照品b-供試品

    ??2.2對照品溶液的制備精細稱取綠原酸對照品適量,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成每毫升含35.8μg的溶液,即得。2.3供試品溶液的制備精細稱取本提取物10mg,置100ml容量瓶中,雙蒸水溶解,超聲2min后,再用雙蒸水定容至刻度,搖勻,過0.45μg微孔濾膜,取續濾液即得。

    ??2.4線性范圍的考察及其規范曲線的制作精細汲取對照品溶液2,4,6,10,14,18μl,別離注入液相色譜儀。按上述色譜條件測定峰面積。以峰面積積分值(A)對進樣量進行回歸,得回歸曲線方程:Y=2468.4X-16.205,r=0.9996。成果標明,綠原酸在0.0716~0.6444μg范圍內與峰面積呈******的線性關系。

    ??2.5精細度試驗精細汲取對照品溶液10μl,按上述色譜條件重復進樣6次,記載各組綠原酸峰面積值,成果均勻峰面積為:840.5,RSD為0.69%(n=6)。

    ??2.6安穩性試驗取同一供試品溶液,別離于0,2,4,6,8h進樣10μl,測得綠原酸的均勻峰面積值為:680.24,RSD為:0.38%(n=5),標明供試品溶液在8h內安穩。

    ??2.7重復性試驗取同一批號(070204)樣品6份,按含量測定辦法測定,成果綠原酸均勻含量為28.01%,RSD為1.07%(n=6)。

    ??2.8加樣回收率試驗精細稱取已知含量的金銀花提取物6份,別離精細增加綠原酸對照品適量,按供試品溶液的辦法制備,測定,核算回收率。

    ??2.9樣品測定取3批樣品,依照上述辦法制備供試品溶液,進樣10μl,依照已斷定的色譜條件測定,按峰面積值用外標法核算樣品中綠原酸的含量。

    ??3評論

    ??金銀花提取物以有機酸為有用成分,本試驗以綠原酸含量作為金銀花提取物的質量操控目標,一起測定了3批金銀花提取物中綠原酸的含量,經過核算,其含量均在20%以上。本文所樹立的辦法簡潔、方便,重復性及安穩性均較好,可在實際出產中用于該提取物的質量操控。本文所做的工作為開發金銀花的相關產品供給了質量監控辦法。

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